人教版教科书高中《生物》必修一有个实验《观察根尖分生组织细胞的有丝分裂》和必修二中有个实验《低温诱导植物染色体数目的变化》,这两个实验中都有一个很关键的实验操作步骤,即植物根尖细胞装片的制作。通常,学生们按照教科书中介绍的根尖装片制作要领进行操作,大多数学生所制作的装片,在显微镜下观察实验效果是不太理想的。为此,笔者通过对该装片制作的方法进行了改进,成就了一种好方法──“一片式”操作法来完成根尖细胞装片制作的全流程。
一、 根尖细胞装片制作的“一片式”操作法的方法步骤
(一) 压片 剪取长度约为4~5?的植物根尖,放在载玻片的中央上,盖上另一片载玻片,用左手的手指固定住这2片载玻片,用右手的拇指按压载玻片,将根尖压扁,并用镊子柄端对着根尖的尖端(分生区部位)轻轻地敲击数下,然后,拿去上面的一片载玻片。
(二) 解离 对着已被压成扁平状的根尖,加1~2滴质量分数为15%盐酸和体积分数为95%酒精的混合液(1 : 1),在室温下解离,解离时间约为3min。
(三) 漂洗 用吸水纸吸去多余的解离液,然后加2滴清水,漂洗时间约为2 min。
(四) 染色 用吸水纸吸去清水,然后加一滴质量浓度为0.005g / mL的龙胆紫溶液。染色时间约为1min
(五) 去浮色 用吸水纸吸去多余的染液,然后加2滴体积分数为50%的酒精,洗去浮色的时间约为1min。
(六) 制片 用吸水纸吸去多余的酒精溶液,然后加一滴清水,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用左手的手指将上下两片载玻片固定住;用右手拇指的指甲对着根尖的尖端轻轻敲击,边操作边用眼睛观察,直到根尖细胞均匀地扩散成云雾状的薄层,拿去上面的载玻片,根尖细胞装片制作即告完成。
二、“一片式”操作法的优点
“一片式”操作法与原方法的对比,具有一些良好的优点。
(一) 实验仪器因陋就简。 原方法操作中的实验仪器需要用3个培养皿,根尖要在第一个培养皿里解离,要在第二个培养皿里漂洗,要在第三个培养皿里染色。而新方法操作中不需要培养皿,根尖从始至终都是在同一片载玻片上进行操作着,并完成根尖装片制作的所有流程,能做到了实验仪器的因陋就简,实验操作的简便快捷。
(二) 实验药品的使用量大大减少。原方法操作中每个实验小组的解离液和染色液的使用量都在1ml以上,而新方法操作中每个实验小组的解离液、染色液的使用量只需要1~2滴就可以,从而节约了大量的实验药品,做到了低成本高效率地进行实验教学。特别是解离液中所含的质量分数为15%的盐酸的使用量,由高使用量减少到极少的使用量,实践了实验药品要安全使用的新课程理念。
(一) 实验效果大大提高。 原方法操作中,学生们要完成根尖装片制作的时间一般都在二十几分钟以上,实验结果也不太理想,实验成功率低。而新方法操作中,学生们要完成根尖装片制作的时间一般是十几分钟就足够了,实验效果良好,实验成功率高,所以整个实验效果也就大大提高了。
三、 新方法实验操作的相关说明
(一) 剪取植物根尖的时间,应该是根尖细胞在一天之中有丝分裂最活跃的时间。如洋葱根尖的取材时间是上午10时至下午2时,尤其是以上午11时30分左右为最佳的取材时间。如果实验课的时间与根尖细胞有丝分裂活跃的时间不一致时,可以在根尖细胞有丝分裂活跃的时间内将根尖剪取下来,接着用固定液固定。当上实验课时再把根尖分发给学生们做实验。
(二) 剪取根尖的长度是以4~5?为宜。 教材上叙述是:剪取根尖2~3?。这样不妥。因为根尖过短操作起来有许多不方便,甚至会发生根尖丢失的现象,而长度为4~5?的根尖的装片制作、操作较容易,既不会影响到分生区细胞有丝分裂的观察,又可以在显微镜下观察到伸长区和根毛区细胞,这有利于对比观察根尖的四种组织细胞。
(三) 染色剂龙胆紫溶液的质量浓度应该以0.005g/ml为宜,而浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液易使根尖细胞染色过深,从而影响有丝分裂的各种现象的观察。
经过实践证明,根尖细胞装片制作的“一片式”操作法有多利而无一害。因此,笔者建议人教版教科书高中《生物》必修一中的实验《观察根尖分生组织细胞的有丝分裂》和必修二中的实验《低温诱导植物染色体数目的变化》,这两个实验中有关根尖细胞装片制作的方法步骤应该采用“一片式”操作法来进行实验教学。
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