实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞(必修一P7)
1、是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮?为什么?
低倍镜的视野大，通过的光多，放大的倍数小;高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。
2、为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察?
如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。
3、用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行?
不行。用高倍镜观察，只需转动细准焦螺旋即可。转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。
4、使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?
答：(1)首先用低倍镜观察，找到要观察的物像，移到视野的中央。
(2)转动转换器，用高倍镜观察，并轻轻转动细准焦螺旋，直到看清楚材料为止。
5、总结：四个比例关系
a.镜头长度与放大倍数：物镜镜头越长，放大倍数越大，而目镜正好与之相反。
b.物镜头放大倍数与玻片距离：倍数越大(镜头长)距离越近。
c.放大倍数与视野亮度：放大倍数越大，视野越暗。
d.放大倍数与视野范围：放大倍数越大，视野范围越小。
实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布
实验原理：DNA 绿色(甲基绿试剂)，RNA 红色(吡罗红试剂)
分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
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实验二 物质鉴定
还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀 脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色 脂 肪 + 苏丹IV～ 红色
蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应
1、还原糖的检测
(1)材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。
(2)试剂：斐林试剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，现配现用。 (3)步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
2、脂肪的检测
(1)材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
(2)步骤： 制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精) ↓
制作装片(滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片) ↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
3、蛋白质的检测
(1)试剂：双缩脲试剂(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液) (2)步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色) 考点提示：
(1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
(2 )还原性糖植物组织取材条件?
含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
(3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?
加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。
(4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?
为何要现混现用? 混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。
(5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为： 浅蓝色 棕色 砖红色 (6)花生种子切片为何要薄? 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。
(7)转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么? 切片的厚薄不均匀。
(8)脂肪鉴定中乙醇作用? 洗去浮色。
(9)双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?先加A液的目的。怎样通过对比看颜色变化? 不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。
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实验三 观察叶绿体和细胞质流动
1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片
2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。 知识概要：
取材 制片 低倍观察 高倍观察 考点提示：
(1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶?
因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。
(2)取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉?
表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。
(3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度?最适温度是多少? 进行光照、提高水温、切伤部分叶片;25℃左右。
(4)对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显?
叶脉附近的细胞。
(5)若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的?
仍为顺时针。
(6)是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动? 否，活细胞的细胞质都是流动的。
(7)若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节?
视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。
(8)在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化?叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。
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实验四 观察有丝分裂
1、 材料：洋葱根尖(葱，蒜)
2、 2、步骤：(一)洋葱根尖的培养 (二)装片的制作
制作流程：解离→漂洗→染色→制片
1. 解离: 药液: 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1 : 1混合液). 时间: 3~5min .目的: 使组织中的细胞相互分离开来.
2. 漂洗: 用清水漂洗约10min. 目的: 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.
3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~ 5min 目的: 使染色体着色,利于观察.
4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的: 使细胞分散开来,有利于观察. (三)观察
1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。 2、换高倍镜下观察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。(注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点)。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。 考点提示：
(1)培养根尖时，为何要经常换水?
增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。
(2)培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱?为什么?
应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。
(3)为何每条根只能用根尖?取根尖的最佳时间是何时?为何?
因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂;上午10时到下午2时;因为此时细胞分裂活跃。
(4)解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一块载玻片?
解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来;再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。
(5)若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么?
压片时用力过大。
(6)解离过程中盐酸的作用是什么?丙酮可代替吗?
分解和溶解细胞间质;不能，而硝酸可代替。
(7)为何要漂洗?
洗去盐酸便于染色。
(8)细胞中染色最深的结构是什么?
染色最深的结构是染色质或染色体。
(9)若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么?
染液浓度过大或染色时间过长。
(10)为何要找分生区?分生区的特点是什么?能用高倍物镜找分生区吗?为什么?
因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂;分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态;不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。
(11)分生区细胞中，什么时期的细胞最多?为什么?
间期;因为在细胞周期中，间期时间最长。
(12)所观察的细胞能从中期变化到后期吗?为什么?
不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。
(13)观察洋葱表皮细胞能否看到染色体?为什么?
不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。
(14)若观察时不能看到染色体，其原因是什么?
没有找到分生区细胞;没有找到处于分裂期的细胞;染液过稀;染色时间过短。
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实验五 比较酶和Fe3+的催化效率
考点提示：
(1)为何要选新鲜的肝脏?
因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。
(2)该实验中所用试管应选较粗的还是较细的?为什么?
应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。
(3)为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗?
因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富;其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。
(4)相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好?为什么?
研磨液效果好;因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。
(5)滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管?为什么?
不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。
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实验六 色素的提取和分离
1、原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇??提取色素 各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同??分离色素 2、步骤：
(1)提取色素 研磨 (2)制备滤纸条
(3)画滤液细线：均匀，直，细，重复若干次 (干了之后) (4)分离色素：不能让滤液细线触及层析液
(5)观察和记录: 结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b). 考点提示：
(1)对叶片的要求?为何要去掉叶柄和粗的时脉?
绿色、最好是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素很少。
(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅对实验有何影响?
为了使研磨充分。不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。
(3)丙酮的作用?它可用什么来替代?用水能替代吗?
溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。
(4)碳酸钙的作用?不加碳酸钙对实验有何影响?
保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。
(5)研磨为何要迅速?要充分?过滤时为何用布不用滤纸? 研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发;只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。
(6)滤纸条为何要剪去两角? 防止两侧层析液扩散过快。
(7)为何不能用钢笔或圆珠笔画线? 因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。
(8) 滤液细线为何要直?为何要重画几次?
防止色素带的重叠;增加色素量，使色素带的颜色更深一些。
(9) 滤液细线为何不能触到层析液?
防止色素溶解到层析液中。
(10)滤纸条上色素为何会分离?
由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。
(11)色素带最宽的是什么色素?它在层析液中的溶解度比什么色素大一些? 最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。
(12)滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素? 胡萝卜素和叶黄素。
(13)色素带最窄的是第几条色素带?为何?
第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。
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实验七 观察质壁分离和复原
1、条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡
2、材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡)，质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。 3、步骤：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水, 另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
4、结论: 细胞外溶液浓度 > 细胞内溶液浓度，细胞失水 质壁分离 细胞外溶液浓度 < 细胞内溶液浓度，细胞吸水 质壁分离复原
知识概要：制片 观察 加液 观察 加水 观察
考点提示： (1)洋葱为何要选紫色的?若紫色过淡怎么办?
紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观察液泡的大小变化;缩小光圈，使视野变暗些。
(2)洋葱表皮应撕还是削?为何? 表皮应撕不能削，因为削的表
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实验八 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)
一实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
1、可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O，即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2、脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。淀粉遇碘变蓝色。
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。)
二 实验材料
1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅，易于观察。)
2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
三、实验注意事项
1、可溶性糖的鉴定
a.应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
b. 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu ( OH ) 2生成。
2、蛋白质的鉴定
a. A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液;先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。
b、CuSO4溶液不能多加;否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
c. 蛋清要先稀释;如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。
3、斐林试剂与双缩脲试剂的区别：
斐林试剂
双缩脲试剂
试剂成分
0.1g/mlNaOH溶液
0.1g/mlNaOH溶液（双缩脲试剂A）
0.05g/mlCuSO4溶液
0.01g/mlCuSO4溶液（双缩脲试剂B）
是否混合
混合后再滴加
先加双缩脲试剂A后加双缩脲试剂B
是否加热
水浴加热
不加热
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实验九：观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)
实验原理：
1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
2.盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。
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实验十：用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体(必修一P47)
一 实验原理：
1.叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。
2.线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
3.健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色
二 实验材料：
观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。
若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。
三 讨论
1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的?为什么?
答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。
2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系?
答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。
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实验十一 观察植物细胞的吸水和失水(必修一P61“探究”)
一 实验原理：
1.质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。
2.质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
二 实验材料和方法：
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。
质壁分离的方法(引流法)：制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片。然后，从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次即可。
质壁分离复原的方法：改用清水实验。
三 讨论
1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象?答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离?为什么?
答：不会。因为红细胞不具细胞壁。
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