高中生物DNA粗提取与鉴定方法

编辑: 逍遥路 关键词: 高中生物 来源: 高中学习网


高中化学dna的粗提取与鉴定学习方法一提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于dna的粗提取而言,就是要利用dna与rn

高中化学dna的粗提取与鉴定学习方法一

提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于dna的粗提取而言,就是要利用dna与rna 蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取dna,去除其他成分。

1高中生物dna的溶解性

dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使dna充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。

2高中生物dna对酶 高温和洗涤剂的耐受性

蛋白酶能水解蛋白质,但是对dna没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080oc的高温,而dna在80oc以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对dna没有影响。

3高中生物dna的鉴定

在沸水浴条件下,dna遇二苯胺会被染成蓝色。

4实验材料的选取

凡是含有dna的生物材料都可以考虑,但是使用dna含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。

5破碎细胞,获取含dna的滤液

在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。

6去除滤液中的杂质

方案一的原理是dna在不同浓度nacl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解dna;方案三的原理是蛋白质和dna的变性温度不同。

特别提醒:

①为什么反复地溶解与析出dna,能够去除杂质?

用高盐浓度的溶液溶解dna,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使dna析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出dna,就能够除去与dna溶解度不同的多种杂质。

②方案二与方案三的原理有什么不同?

方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的dna与蛋白质分开;方案三利用的是dna和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与dna分离。

7高中生物dna的析出与鉴定

将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等 冷却的酒精溶液

向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有dna的溶液是否变蓝。

8以血液为实验材料时

每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。

9二苯胺试剂

要现配现用,否则会影响鉴定的效果。

10dna的溶解度与nacl溶液浓度的关系:

当nacl溶液浓度低于0.14mol/l时,随浓度的升高,dna的溶解度降低;当nacl溶液浓度高于0.14mol/l时,随浓度升高,dna的溶解度升高,实验选用2mol/lnacl和0.015mol/lnacl做溶解试剂。

11盛放鸡血细胞液的容器

最好是塑料容器。

高中化学dna的粗提取与鉴定学习方法二

项目方法步骤添加物质及目的操作要求及目的
取用与要求目的要求目的
制备鸡血细胞液(教师准备)取0.1g/ml的柠檬酸钠100ml于500ml烧杯中,加鸡血180ml抗凝缓慢搅拌混匀血液与柠檬酸钠,防血凝
离心或置于冰箱使血细胞与血浆分离
1.提取鸡血细胞的细胞核物质20ml蒸馏水促进血细胞吸水破裂,释放核物质搅拌:单向 快速 5min加速血细胞破裂
过滤:1-2层纱布滤取含dna的滤液
2.溶解细胞核内的dna2mol/l的nacl溶液40ml溶解dna搅拌:单向 缓慢 1min促进dna溶解
3.析出含dna的黏稠物加蒸馏水至黏稠物不增加为止降低nacl溶液浓度,析出dna搅拌:单向 轻轻混匀溶液,促进析出完整dna分子
4.滤取含dna的黏稠物

3层~4层纱布过滤获取含dna的黏稠物
5.将dna的黏稠物再溶解2mol/l的nacl溶液20ml再溶解dna单向搅拌使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中
6.过滤含有dna的氯化钠溶液

3层~4层纱布过滤滤取含dna的滤液
7.提取含杂质较少的dna加入冷却的 体积分数为95%的酒精50ml让部分杂质溶于酒精,析出含杂质较少的dna搅拌:单向促进杂质溶解 dna析出
用玻璃棒卷起丝状物,用滤纸吸水获得dna(白色乳状丝状物)
8.dna的鉴定向2支20ml试管各加0.015mol/l的nacl溶液一支对照,一支溶解dna(作溶媒)搅拌促进dna溶解
各加4ml二苯胺试剂作为dna鉴定剂沸水浴5min,冷却观察颜色dna所在试管溶液变蓝色

到了高中,你首先要明确的一点就是,在高中,学习的科目没有大科、小科之分,只有高考和非高考科目之分。比如对于理倾学生来说,语数外、理化生是高考科目,其他为非高考科目;对于文倾学生来说,语数外、政史地是高考科目,其他为非高考科目。因此,如果大家把生物当成初中的小科,当成文科来看待,指望考前背一背,可以这样说,这种情况下你的高中生物是根本学不好的。如果你指望生物考前背背就可以考高分,那是天方夜谭!可以毫不夸张地说,在高中尤其是在生物考试中,你也很难取得高分,更何况你考前背背呢。

生物学习方法小经验

1、考试范围:必修二全册和必修三第一、二章。试卷上有50道选择题共50分,简答题50分,其中包括实验设计一道

2、复习注意:首先是下功夫,扎实细致地进行复习,投入的时间和精力总是能反映在成绩上的。其次是注意生物复习方法,牢固掌握基础知识,特别是基本概念和基本原理,要在理解的基础上进行记忆;有针对性的多做一些习题,对做错的习题所涉及的知识点要特别注意复习巩固、加深理解,避免再次出错;翻阅以前的习题、试卷,对一些以前出错的题重复做一遍;考试时先做简单的题目,先把稳得的分得到,仔细审题,抓住要点。

3、生物是一个偏文的学科,因此有些知识点一定要记扎实,“当背则背”,没有商量的余地。它不像数学、物理,掌握一个公式、定理,就能在做题是有很大的发挥空间。生物往往会要求你一字不差的答出某概念,比如,问:能释放抗体的细胞是什么?答案应为浆细胞(效应B细胞亦可),但不可以答“B细胞”,又如,问:少量生长素可促进生长,过量生长素会抑制生长,这种现象说明?应答生长素具有两重性,答“双重性”就一分也没有唉。因为严密是生物科的特点,一个概念,差之毫厘的结果---往往是谬以千里。这又恰恰体现了理科科目的严谨。


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